龙胆为龙胆科植物龙胆Gentiana scabra Bge.、条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、三花龙胆Gentiana triflora Pall.或坚龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根和根茎[1]。首载于《神农本草经》，其味苦，性寒，归肝、胆经，有清热燥湿、泻肝胆火的作用[2]。除坚龙胆外，主产于内蒙古、河北及东北三省地区。

近年来，由于中药用量大幅度增加，促使饮片生产逐渐由小规模作坊式转向现代化、工业化、标准化和规范化，且随着《中华人民共和国中医药法》的实施和中药标准化项目的设立，饮片标准化生产的重要性也逐渐显现[3-6]。龙胆作为常用大宗药材，饮片生产过程较为简单，主要有“选、洗、润、切、干”五道工序。在前期已得出龙胆在实际工业中最佳生产方法的基础上，本研究选择不同产地、不同等级的龙胆药材，以龙胆苦苷和水溶性浸出物的含量为指标，探究饮片生产过程中对其质量产生影响的因素，为龙胆从药材到饮片的生产过程中的质量传递提供依据。

1 材料与仪器

1.1 材料 龙胆苦苷对照品（批号：-）购于中国药品生物制品检定所，甲醇为分析纯（北京化工厂）、色谱纯（Fisher Chemical）；水为超纯水。龙胆药材由吉林北药药材加工公司提供，基源由各产地工作人员鉴定龙胆药材来源，见表1。

1.2 仪器 PM1 000 高效液相色谱仪（日立仪器有限公司），BT25S电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司），PTX-FA110S 万分之一电子天平（福州华志科学仪器有限公司），YM-100S 超声波清洗机（深圳市语盟超声波清洗剂设备厂），Medium-s300 实验室纯水系统（上海和泰仪器有限公司）。

炮制机械设备来自吉林省北药药材加工有限公司药品生产质量管理规范（GMP）车间，主要有筛选机（型号：SX-2，富阳亳州康华制药机械有限公司）、振动筛（型号：XZS-2，天津市渤海鑫茂制药设备有限公司）、变频风选机（型号：FX-1，天津市渤海鑫茂制药设备有限公司）、热风循环烘箱（型号：CT-C-I，南京飞翔干燥制冷设备厂）、直线往复式切药机（型号：WFQY-300，天津市渤海鑫茂制药设备有限公司）。

表1 龙胆药材来源

2 方法与结果

2.1 龙胆苦苷含量测定方法

2.1.1 色谱条件 PM-1 000 日立高效液相色谱仪；色谱柱Agilent XDB-C18 柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）；流动相为甲醇（A）:水（B），洗脱程序为：0～20 min，20%A，20～80 min，25%～75%A，80～90 min，100%A，90～100 min，20%A；流速为0.8 mL/min；柱温为35℃；检测波长为243 nm；进样量为10 μL。

2.1.2 对照品溶液的制备 取一定量龙胆苦苷对照品置于20 mL 容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，制成浓度为1.201 mg/mL 的对照品溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备 取批次1 龙胆适量，粉碎，过四号筛，取约0.5 g，精密称定，置20 mL 容量瓶中，加50%甲醇约18 mL，超声（功率250 W，频率20 kHz）30 min，取出，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液过0.45 μm 微孔滤膜，即得。

2.1.4 线性关系 取“2.1.2”对照品溶液，分别进样4、8、12、16、20、24 μL，测定峰面积。以进样体积、峰面积为横、纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为Y=1,413,755,,438.07，r=1.00，在4.802～28.812 μg 范围内，龙胆苦苷线性良好。

2.1.5 重复性 在批次1 中平行取6 份样品，按“2.1.3”方法制备供试品溶液，按“2.1.1”条件依次进样，记录色谱峰面积，计算龙胆苦苷含量。测定结果为：龙胆苦苷含量平均为4.788%，RSD 为：0.09%，方法重复性良好。

2.1.6 稳定性 取批次1 样品适量制备供试品溶液，室温下放置，在0、4、8、12、16、20、24 h 按“2.1.1”方法分别测定，记录峰面积。龙胆苦苷色谱峰面积RSD 为0.51%，供试品溶液24 h 内稳定性良好。

2.1.7 精密度 取批次1 同一供试品溶液，按“2.1.1”条件连续进样测定6 次，记录峰面积。龙胆苦苷色谱峰面积RSD 为0.23%，仪器精密度良好。

2.1.8 加样回收率 取批次1 龙胆粉末样品（已知成分含量）6 份，约0.5 g，精密称定，加入龙胆苦苷对照品适量，按“2.1.3”方法制备加样供试品溶液，按“2.1.1”条件测定，记录峰面积，计算含量及回收率。结果龙胆苦苷回收率为99.93%，RSD 为1.09%。回收率在95.0%～105.0%之间，RSD 均小于3.0%，该方法回收率较好。

2.1.9 样品测定 称取龙胆样品，按“2.1.3”项下操作制备龙胆供试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件，分别进样10 μL，测定峰面积，见图1 和图2。各样品龙胆苦苷及水溶性浸出物含量，见表2。各批次龙胆中龙胆苦苷含量均符合《中国药典》2015 版标准。